色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分离。1906年Tswett 研究植物色素分离时提出色谱法概念;他在研究植物叶的色素成分时,将植色谱物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内,然后加入使其自由流下,结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。按光谱的命名方式,这种方法因此得名为色谱法。以后此法逐渐应用于无色物质的分离,“色谱”二字虽已失去原来的含义,但仍被人们沿用至今。在色谱法中,静止不动的一相(固体或液体)称为固定相(stationary phase) ;如试样在常用溶剂中不溶解,可将试样与适量的吸附剂在乳钵中研磨混匀后加入。运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相(mobile phase)。
堵”的原因之一:纯水中的***污染首先我们要认识到,一般的国产甲1醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是有些固态微粒杂质,也能在液相流路系统的过滤头上排除,真正容易引起问题的,是水中的***。新制备的纯水在室内放置几天就会长菌,而这些***虽然肉眼不可见,却足以堵塞柱填料颗粒的空隙,造成柱子很快报废。这就是在配制流动相时造成的***污染的原因,解决它的方法很简单,就是确保水的可靠性。当然选项用PEEK接头是一较好是一个较好的解决方法,不仅通用性好,而且靠手拧就能保证不漏液。
有两种方式推荐:
(1)的方式当然是购买实验室专用纯水机,既方便又可靠,质量也放心。缺点就是价格不菲。
(2)成箱购买市售纯净水,这些水的质量足以应付液相色谱的要求。先随机抽取一支做一下***平板实验,待菌落数合格方可使用。这样每次只要单独开一支即可,也很方便。每次成本2元左右。这里特别指出一个细节:在绝大多数书本上,凡谈到配制流动相都会谈到后一个过滤的步骤。但是从我们长期使用的实际效果来说,只要能保证水的质量,这一步完全可以也应当去除。等所有问题解决后,将色谱柱出口从瓶中取出,保证柱端口无溶剂残留,再进行下一步的安装。
国产液相色谱仪的特点: 1、超高速分析: 超高的耐压水平:140MPa,可真正实现超高速分析。因系统耐压增强,有些会导致压力升高的流动相也可使用,这样扩大了可选分析方法的范围,非常适合复杂成分的检测和分析方法的开发。 2、高分辨分析: 新开发的色谱柱,理论塔板数高达50,000以上,耐压高达140MPa,实现了真正的超高分辨分析。 新型二元泵配有冲程可变***柱塞,除了日立特有的LBT*1技术,还标配低容量双螺纹混合器,这些都确保送液时的混合效果和稳定性更好。 10mm全反射型毛细管流通池,可有效减小柱外扩散,获得更高分辨。 3、高灵敏度分析: 二极管阵列检测器的65mm流通池,灵敏度极高,对痕量物质的检测尤为突出。 二极管阵列(DAD)检测器的新型光学系统有效地减小了噪音和漂移,保证了高灵敏度的分析结果。 自动进样器配有多种清洗模式,标配进样口反冲功能,极大降低了样品残留。RPC主要应用于相对分子质量低于5000,特别是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化,也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。