武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。1)将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。
原位杂交:在研究DNA分子原理的基础上发展起来的一种技术。尤其在***分析和诊断方面能作定性、***和定量分析,已成为的分子病理学技术,同时在分析低丰度和罕见的mRNA表达方面已展示了分子生物学的一重要方向。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应用带有标记的(有性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、等非性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与***切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的 mRNA或DNA 的存在并***;
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。mFISH能同时检测多个***,分辨复杂的染色体易位和微小缺失,区分间期细胞多倍体和超二倍体等。
原位杂交天1. 重新水化和固定1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的PBST溶液,放置5分钟。与病理学检查结果比较,FISH检测的特异性为100%,敏***为87%。2) 置换成30%的PBST溶液,放置5分钟3) 置换成PBST溶液,放置5分钟,重复一次4) 置换成4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟5) 用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。用10ul/ml的蛋白酶K在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松***,以便于杂交。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。方法应用FISH技术分析110例血尿患者尿脱落细胞染色体异常情况,其中包括86例、泌尿系12例、滤泡(腺性)4例、良性(状瘤)4例、不明原因血尿4例。
与其他原位杂交技术相比,荧光原位杂交具有很多优点,主要体现在:①FISH不需要性同位素标记,更经济安全。这些固定液都有不同的优缺点因此要根据具体的实验对象,选择的固定液。②FISH的实验周期短,探针稳定性高,特异性好,***准确,能迅速得到结果。③FISH通过多次化学反应,使杂交信号增强,灵敏度提高,其灵敏度与性探针相当。④多色FISH通过在同一个核中显示不同的颜色可同时检测多种序列。⑤既可以在玻片上显示中期染色体数量或结构的变化。也可以在悬液中显示间期染色体DNA的结构。 [1]