脂肪酸具有长碳氢链和一个羧基末端的有机化合物的总称,和甘油结合生成脂肪,故名;是动物、植物和微生物脂质的基本组成成分。在生物***和细胞中游离形式的脂肪酸仅存痕量。从各种生物体中已分离出100多种脂肪酸。
目前检测脂肪酸的手段主要包括红外吸收光谱法、毛细管电泳法、气相色谱法、阴离子色谱法、Elisa法和气质联用法。其中气相色谱(GC-FID)和气质联用发(GC-MS)测定反式脂肪酸具有宽的检测范围和较高的灵敏度,是较为准确、可靠的分析方法。
华士特生物采用GC-MS建立37种长链脂肪酸,8种短链脂肪酸的定量检测方法。欢迎咨询送检。
华士特脂肪酸定量 检测方法:
1、样品提取
称取适量样品,加入4mL的1醇/CH2Cl2(1:3)混合溶液,摇匀;恒温在30℃以下超声抽提10min。取出离心管,放于离心机中离心(1800rpm,10min),收集上清液,重复3次;将萃取液在柔和氮气流下吹干。
2、萃取液的皂化
加入3mL 6%KOH的1醇溶液(配制:6gKOH/1醇118mL左右),超声10min,放置30min,重复3次,室温放置过夜(瓶盖盖紧)进行碱水解;加入2mL正己烷,超声10min,摇匀,震荡离心,弃除上层正己烷萃取液,重复3次。在上述萃取完剩下的溶液中(水相),加入约1mL 4N的HCl使pHlt;2,再用2mL正己烷萃取3次。
3、脂肪酸的衍生化
将上述萃取液,转移到带盖玻璃管中,用氮气吹干后,加入约2mL BF3-MeOH,玻璃管上空间冲入氮气后盖盖密闭,于90℃下加热2h;待样品冷却后,加入5%N***溶液约1ml,用2ml正己烷萃取3次,并将萃取液转移到2mL进样瓶中,氮气吹干,待分析。
4、色谱条件
色谱柱:Thermo TG-5MS 30m x 0.25mm x 0.25?m
升温程序:80度起始温度,保持1分钟;10度/min升温到200度,5度/min升温到225度,2度/min升温到250度,保持5min。
MS,EI源。
华士特生物专注于生命科学研发与技术服务领域,拥有“分离纯化平台”、“分析检测平台”、“组学测试分析”等技术服务平台。公司设备平台包括液相色谱、离子色谱、凝胶色谱、毛细管电泳、GC-MS、HPLC-MS、DSC、TGA等多种高精密实验仪器。公司还享有武汉生物技术研究院公共技术服务平台,是华中地区设备***、功能齐全的生物实验仪器共享平台。***的数据库:拥有多个商业数据库,同时建立了超过百个标准晶数据库,使定性更加准确。
华士特生物提供DHA、ARA、AA等长链脂肪酸及其他短链脂肪酸检测,可检测脂肪酸37种。海洋鱼类是提取DHA的主要来源。海产鱼类特别是中上层鱼类的油脂中含有大量的DHA,如鲔鱼、秋刀鱼、远东沙丁鱼的油中DHA的含量均在10%以上。目前全世界鱼类油脂的年产量在100万吨左右,理论上从中可提取10~25万吨。实际上由于分离技术等因素的限制,鱼的油脂产量要低于上述数字、而且提取的鱼类油脂有相当大的部分被氧化和渗入人造黄油或起酥油中被消耗掉,真正可用于分离DHA的仅占少部分。除此之外还有贝类和甲壳类。