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上海瑞基生物科技有限公司

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瑞基生物科技有限公司www.realgene.com.cnRealGene是一家致力于发展成为生物医药研发外包服务公司。坐落在上海闵行区，紫竹科技园；毗邻上海交大、华东师范大学，及国际知名跨国公司，学术氛围浓郁，具有得天独厚的人文环境。瑞基拥有1400平方实验大楼，配备有齐全的研发、实验设备，以满足......

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荧光定量PCR

产品编号：2936769 更新时间：2020-08-15

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上海瑞基生物科技有限公司

主营业务：蛋白服务，基因服务，分子生物试剂服务
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产品详情

***服务

荧光定量PCR

荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，是一种具有革命意义的定量PCR技术。其原理是在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来实时测定特异性产物的量，并据此推断目的***的初始量。由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，具有特异性更强、闭管实时测定、自动化程度高等特点，已成为国际公认的核酸分子定量的金标准，在***表达研究和临床***检测等领域得到了广泛的应用。

瑞基生物为您提供荧光定量PCR一站式解决方案，您只需准备好样品，其余全部由我们来为您完成。有染料法（SYBR Green）和探针法（Taqman、分子信标等）两种实验方法可供选择。实验中所用***全部为进口***产品，确保为您提供***的检测数据，获得生物学相关的结果。

主要服务内容包括：

1.引物、探针设计与合成：根据***序列设计并合成特异性real-time PCR引物和探针。
2. RNA抽提：
（1）***样品：取100mg***样品加1ml Trizol，匀浆后抽提RNA。
（2）细胞样品：取1×107个细胞，PBS洗涤三次，去PBS后加1ml Trizol，裂解后抽提RNA。
3. RNA质量检测：
（1）测定RNA在260nm和280nm波长处的吸收值，以计算其浓度并评估纯度。
（2）变性琼脂糖凝胶电泳，检测RNA纯度及完整性。
4. 逆转录：使用逆转录酶（RNase H-）将样品RNA逆转录为cDNA。
6. 标准曲线制备：将标准品质粒做梯度稀释后，进行real-time PCR扩增和检测，以Ct值对拷贝数绘制标准曲线。
7. 定量PCR反应：将待测样品加入优化过的real-time PCR反应液中，进行real-time PCR扩增，检测目的***和内参***的Ct值。每反应均做3个平行复孔。
8. 数据分析：
（1）相对定量：使用△△Ct法计算目的***在不同组间的表达差异。
（2）***定量：将样品的Ct值代入标准曲线，以对目的***进行定量。
（3）熔解曲线分析：确定产物特异性。
9. 实验报告：
（1）详细实验步骤。
（2）数据结果和相关图表

您需提供：
1. 新鲜的***样品或细胞样品，干冰保存。
2. 背景资料：目的***的Gene ID、样品来源和mRNA丰度等。

收费标准及实验周期：
1. RNA提取费用：
少于20样品：150元/个
    20样品以上：120元/个
2. 定量PCR反应费用：
    一个***每样品150元
    二个***每样品120元
    三个***以上100元/反应
3. 引物和探针合成费用：
    引物：1.6元/bp
    探针：1200元/条
4. 内参引物探针：免费
5. 实验周期一般为两周

- Email: info@.cn;
- 电话: +86-21-54460771 (手机): +86-152 2118 0720
- 传真: +86-21-54460772