徒手切片操作简单,与石蜡切片方法相比不需要进行固定、脱水、浸蜡、包埋等过程,从而大大缩短实验操作流程,减少耗时,且仅在透明和染色过程中需用***处理材料,从而降低实验成本。另外,徒手切片还不需要切片机等贵重仪器,作为对于解剖学突变体的预筛选过程,可以很大程度上减少工作量,提高筛选速率,降低研究成本。还可以作为对需要做石蜡切片观察的实验材料进行初选,及时不需要进行精细观察***结构的实验进行初选,及时不需要进行精细观察***结构的实验研究提供简单方法。传统徒手切片方法为单手利用一片刀片切片,由于水稻和谷子叶片比较窄,质地较软,单手切片不易切出理想材料。本方法利用双手用两片双片双面刀片进行切片,材料切片切口整齐,厚薄均一,且避免了切片时由于来回拉切对材料造成的损伤。谷子和水稻两种植物叶片叶绿素含量很高,且相比较于石蜡切片、半薄切片等厚度均厚许多,不进行透明操作直接进行观察,或是用酒精脱去叶绿素后观察均不能看清细胞边界,本方法水合氯醛 的饱和乳酸溶液进行透明后得到完整、清晰的观察结果。水合氯醛是常用的化学透明剂之一,芽孢涂片,它能够迅速进入***,还可以溶解植物叶绿体、树脂、蛋白质、及细胞内很多种内含物,褐球固氮菌涂片(示荚膜),使植物细胞清晰透明,涂片,易于观察。
盖玻片通常胶合到显微镜载玻片上,以便密封样品免受污染和腐烂。根据样品,使用了许多密封剂,包括商业密封剂,实验室制剂,或甚至常规的透明指甲油。可用于细胞样品的无溶剂密封剂“valap”,f凡士林,羊毛脂和石蜡的混合物等份。
盖玻片是在实验时用来放置实验材料的玻璃片,呈长方形,较厚,透光性好。盖玻片是透明材料的薄且平的玻璃片,醋酸菌涂片,通常为长方形或矩形。
细胞信息传递的基本特征
细胞的信号传递的多通路、多环节、多层次和高度复杂的可控过程。其主要特点概括如下:
(1)多途径、多层次的细胞信号传递通路具有收敛或者发散的特点。 每种受体都能识别与结合各自的特异性配体,来自各种非相关受体的信号,可以在细胞内敛成活成一个共同的效应器的信号,从而引起细胞生理、生化反应和细胞行为的改变。另外,来自相同的配体的信号,又可发散活成各种不同的效应器,导致多样化的细胞应答。
(2)细胞的信号转导既具有专一性又有作用机制的相似性。配体与受体在结构上的互补性是细胞信息转导具有专一性的重要基础,同时,又有作用机制的相似性,否则很难理解 细胞面临几百种纷杂的胞外信号,只通过少数几种第二种第二信使便可介导多种多样的细胞应答反应。正如信号通路的收敛或散发特征中所见到的情况,不同的外源信号可能诱导细胞产生相似的信号转导。如不同细胞与受体结合租车的复合体中往往含有共同亚基,由此诱导相似的信号转导;一种配体与受体结合可诱发多种信号转导途径,如在配体作用下RTK不同位点的硌氨酸残基自体磷酸化,可分别结合不同信号蛋白或接头蛋白,结果引出不同的信号通路,G蛋白与受体偶联可介导腺苷酸环化酶和PLC等。
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