3i 晶格层光显微镜
***研究用时空超分辨率和单分子灵敏度超薄层光显微镜系统
➸概况
3i 晶格层光显微镜系统
空间和时间分辨率的***佳契合点
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空间和时间分辨率的***佳契合点 该显微镜由霍华德.休斯顿***研究所Janelia研究园区的诺贝尔奖获得者Eric Betzig博士发明，被应用到生物系统，跨越了空间和时间的四个数量级。一个高灵敏度的初始物镜加上定制设计的照明系统，允许光学切片使用极低的光剂量并以***的持续时间来进行成像。3D实验之前受限于光毒性，现可以连续监测数小时或数天。高时空分辨率，高速度和高灵敏度的结合使晶格层光成为***显微镜新时代的***工具。 |
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Top and side view volume renderings of HeLa cells expressing mEmerald-Lifeact, dem***trating the higher speed and reduced phototoxicity of the lattice light (right) compared to Bessel beam plane illumination (left) when each is applied to super-resolution structured illumination microscopy (SR-SIM). |
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➸ 优势
3i 晶格层光显微镜系统
光毒性减少
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轴向分辨率增加2倍 |
光毒性和光漂白 10倍~20倍减少 |
常规标本准备 |
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常规的光束产生的是高斯光束，太厚超过细胞直径，只能允许亚细胞成像。无衍射光束穿过成像区域，产生一种亚微米厚度的虚拟光束，非常适用于无创的高速4D成像。 |
通过发散多个低强度超薄、无衍射光束穿过一片广泛的区域，在任意单一平面的强度都被降低，并且非线性光损伤机制的影响缩至***小。 |
标本被培养或安装在一个直径为5毫米的盖玻片上。无需特殊染料或标本处理。标本放置装置具有输入和输出端口，用于灌注加热或冷却介质。 |
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相对于旋转盘共聚焦显微镜， 速度提升20倍 |
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高轴向和时间分辨率同时实现-这是无论旋转盘共聚焦或者高斯光束都无法实现的范例。 |
➸ System
3i 晶格层光显微镜系统
切缘显微镜，使用简单易用的SlideBook™ 界面
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晶格层光在标本上方水界面直角处结合了两个高***性物镜。25X/1.1NA成像物镜是一个带校正环和长2毫米工作距离水浸没透镜。定制设计的0.71NA长工作距离的照明物镜被构造成适合紧邻成像物镜并且***照明成像区域，以获得***大的信号和分辨率。第三个物镜位于标本腔室下方，作为观测标本位置的目镜。 |
照明是高度***用于在特别薄的光层里达到***佳能量输送。一个高速的空间光调制器（SLM）与环形掩模,允许密闭空间光晶格被投射到样品上。一个振镜来控制晶格运动，要么是抖动形成的均匀光片要么是离散开，加强了超高分辨率结构照明显微系统（SIM）。 |
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使用一个高速高分辨率sCMOS探测器来***图像。 SlideBook™ 6软件控制系统的各个方面，当提供纠偏原始数据，去卷积和查看三维样品图能力时，允许激光发射的复杂高速同步，空间光调制器图形显示，振镜运动和探测器读出，样品室和系统通过环保控制支持长期***实验。接入端口支持灌注刺激剂，通过使用SlideBook™ 6控制输送数字化时间表和成像同步。 |
➸规格
技术参数
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部件 |
3i晶格层光 |
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照明光学元件 |
定制镜头 |
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照明 |
- 透射式LED和落射荧光LED用于***样品 - 405nm, 445nm, 488nm, 514nm, 561nm, 640nm |
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检测模块 |
尼康 25x/1.1，工作距离2mm 配备500nm焦距管镜头，62.5x |
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样品室 |
5mm盖玻片 |
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软件 |
SlideBook™ |
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细胞培养装置 |
- 灌注标本室带加热和CO2控制 - 可溶性因子灌注口，可用SlideBook编程调度 |
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采集速度 |
1,000 frames/sec, 100 x 20 um in xy field of view, 3D 18,000 frames/sec, 53 x 53 um in xyfield of view, 2D |
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检测光谱范围 |
400 - 740nm |
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检测放大 |
0 - 2.5x, continuous |
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观测区域XYZ（um） |
100um x 70 um x 100um |
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488nm激发波长下XYZ分辨率（nm） |
150 x 230 x 280 (SIM) 230 x 230 x 370 (Dither) |
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光片厚度（nm） |
Light Sheet Thickness (nm) |
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探测器 |
滨松ORCA-Flash 4.0 v2 sCMOS可以通过C卡口连接到双探测器口 |
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像素尺寸 ***大像素格式 位元深度 ***大帧率 |
6.5um 2048 x 2048 (4.2 Mpixel) 16 bit 100fps 全帧 |
➸ About 3i
智能成像技术的创新
新的创新解决技术局限性
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Intelligent Imaging Innovati*** (3i)设计并制造切缘***和***显微成像平台，由我们SlideBook?软件驱动。3i由一群科学家创建与1995年，他们的研究活动涵盖了细胞生物学、***学、***科学和计算机科学。
我们的共同目标是提供***的多位显微平台，简单易用，模块化设计，并且满足生物学研究领域的***不断变化的需求。
3i的总部设在美国科罗拉多州丹佛市，是一个采用100%再生材料的下线出租车维修厂。建筑包括其他可回收和再利用项目，如曲棍球玻璃，回收的托盘架，铁路棚车地板，和一个由2000个再生PET塑料水瓶组成的“细胞”墙系统。
3i的欧洲总部位于德国哥廷根，是***哥廷根大学乔治?奥古斯特的家乡。
此外，3i与美国（圣地亚哥，洛杉矶，巴尔的摩）和欧洲（伦敦，巴西）的应用和研究科学家有着广泛的业务往来。3i的合作伙伴遍及世界各地，包括中国及周边地区，日本，印度，以色列等地，均有经销商。 |
