磷酸化蛋白提取
检测磷酸化蛋白的***是针对该蛋白的特异性磷酸化位点的,而检测总蛋白的***一般针对的是该蛋白
别的位点,故而磷酸化***检测不到总蛋白,而总蛋白***能检测包括磷酸化和未磷酸化蛋白在内的目
的蛋白。磷酸化蛋白的Western Blotting检测是信号通路研究中的经典方法。
1.蛋白的磷酸化是一个非常迅速的反应,所以取样品的过程要迅速,样品要新鲜。
2.提取蛋白后要尽快做,越快越好,否则一些因素导致目的条带很难出来。另外尽量冰上操作,操作时
间尽量短。
3. 封闭液***好用BSA,因为奶粉含有酪蛋白(一种磷蛋白),如果脱脂用奶粉,有可能出现背景深的现
象。建议先用脱脂奶粉,如果背景脏,就改为BSA。
有关磷酸化蛋白提取信息请见:http://.cn/SonList-ml
更多详情请见:http:///st301933/ml