水产养殖弧菌培养基
- 弧菌是对虾细菌性疾病的条件致病菌,一般水体中弧菌数量取决于养殖环境的优劣,当水体中弧菌的数量达到一定数值后就有发生疾病的危险。
水产养殖弧菌培养基包括TCBS琼脂培养基与弧菌显色培养基
TCBS琼脂全称:硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)琼脂,简称TCBS琼脂。 - 水产养殖弧菌培养基(TCBS琼脂)配方(每升):
酵母膏粉 5g
蛋白胨 10g
氯化钠 10g
柠檬酸钠 10g
硫代硫酸钠 10g
胆酸钠 3g
牛胆粉 5g
蔗糖 20g
柠檬酸铁 1g
琼脂 15g
溴麝香草酚兰 0.04g
麝香草酚兰 0.04g
最终pH 8.6±0.2
水产养殖弧菌培养基使用方法:
1、称取TCBS琼脂89g,加入蒸馏水或去离子水1 L,加热搅拌煮沸1—2min溶解后,勿高压灭菌,冷至50℃左右,倾注灭菌平皿,待凝固后备用。
2、测食品:取待检菌的新鲜纯培养物划线接种于平板上,36±1℃培养18—24h。
测水样:取水样(可稀释)0.05mL,滴入制好的培养皿培养基上,用灭菌的三角涂布棒将菌液涂抹均匀,平放于操作台上数分钟,使菌液渗入培养基。36±1℃培养。
选用TCBS作为分离培养各种弧菌的培养基,特异性不是很强;不少细菌在TCBS上也能生长,但生长较慢,需要培养24h后方可长成0.5~1mm的黄、绿色菌落。为有效排除干扰,及时准确地判断出是否存在弧菌属细菌,可结合弧菌属细菌在TCBS培养基上生长的特点:弧菌生长快,菌落大,培养4-5h原划线处有菌苔生长,8-10h可长出小菌落,16h菌落可达2mm;其他菌在TCBS上则无此特点。因此在筛选弧菌属细菌的选择性培养基时要特别注意在确定的培养时间内进行菌落的观察,时间超过即影响其准确性。TCBS培养基筛选的细菌并非全为弧菌,而且弧菌可能只占很少的一部分,其余大量的是其他种类的细菌,如大洋芽孢杆菌和芽孢杆菌可以在TCBS培养基上大量生长。
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