(5) 加0.2M赖氨酸0.25ml，混匀后，置室温2小时。 ﹨0 Y( I* K3 j# M ]
(6) 在搅拌下逐滴加入等体积饱和***铵，置4℃1小时。
(7) 3000rpm离心半小时，弃上清。沉淀物用半饱和***铵洗二次，***后沉淀物溶于少量0.15M PH7.4的PBS中。6 s* w9 j F" v4 N9 R- A ~
(8) 将上述溶液装入透析袋中，对0.15M PH7.4的PB缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏***检测)，10，000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。
3）结果判定：5 l5 y# N% b0 A* V" T2 w5 b. ﹨) B
(1) 定性及效价滴定：用特异性抗原(或抗1体)同酶标记抗1体(或抗***球蛋白抗1体)作双向琼脂扩散试验或***电泳试验。然后用酶的底物使沉淀弧显色，可初步鉴定其活性。***后以直接ELISA法(或在正式实验系统里)对酶结合物进行滴定( 见本节 (三)工作浓度的选择)。
白介素6是一种细胞1因子，已被证实为B细胞分化因子.它是一种抗1体形成系统，它的生理特性，如肝细胞急性蛋白合成的诱导和基于和白介素3协同作用的生长1刺激等，也备受关注. 并且已证实白介素-6与病理学存在稳定的相关关系.例如，报道多种***的生长因子为白介素-6， 骨1髓瘤细胞能合成白介素-6并表达白介素-6受体.此外， 白介素6在多种炎性***和自身******发挥重要的作用. 此***盒能高灵敏度的检测小鼠血1清和细胞基质上清的白介素6 原理 此***盒运用了两种特异性抗1体，洗板后加入TMB底物液显色，显色的强度与小鼠的白介素-6的量成正比. 检测范围 10.94的 700 pg/mL 预期用途
（4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致***作用，应注意防护。有条件者应使用不致***、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。进口分装：检测范围和灵敏度不同，用量少时，可使用分装，犬红细胞生成素(EPO)ELISA***盒，前期是它的长久性不是很好。***盒的标准曲线***1高点OD 值均在2.0±0.2，零孔的OD 值都控制在0.10以下。***盒的标准曲线相关系数R≥0.98。***盒重复性好，板内、板间变异系数均lt;9 %。***的组份都多给20%的富余量，确保完成48/96孔的检测，避免分次检测可能造成***量不足的情况。检测抗1体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30)， 方便试验操作者准确地做稀释工作，保证实验结果的重复性。
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