默沙克生物科技公司(多图)-猪elisa***盒

（2） 包被抗1体（或抗原）的选择：将抗1体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好，吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响，一般多采用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的***适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值***1大而蛋白量***少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。（3）　酶标记抗1体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗1体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗1体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

***标记技术是将一些既易测定又具有高度敏***的物质标记到特异性抗原或抗1体分子上，通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗1体的性质与含量。常用的标记物包括荧光素、酶和放1射性核素等，用这3种标记物进行标记的***检测技术被称为3大***标记技术。目前，使用的***标记物还有化学发光物质、铁蛋白和胶体金等。

ELISA检测***盒应用定性夹心***检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗1体，这些抗1体就会与HEV 的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特异性抗1体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与第1次孵育结合上的HEV IgM抗1体相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，猪elisa***盒，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEV IgM抗1体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入***溶液终止酶和底物间的反应，并在波长: 450nm处测量O.D.值，按照本HEV IgM抗1体elisa***盒的测试标准， O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。