




武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
1. ELISA的原理
ELISA的基础是抗原或抗1体的固相化及抗原或抗1体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗1体仍保持其***学活性,酶标记的抗原或抗1体既保留其***学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗1体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗1体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗1体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗1体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了***反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
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6.***样本如何处理?
用预冷的PSB (0.01M,pH=7.4)冲洗***,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将***剪碎。将剪碎的***与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的***样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑1制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解***细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。***后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。
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双抗1体夹心法是检测抗原***1常用的方法,操作步骤如下:
1)将特异性抗1体与固相载体联结,酶联******盒价格,形成固相抗1体。洗涤除去未结合的抗1体及杂质。
2)加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗1体结合,形成固相抗原抗1体复合物。洗涤除去其他未结合物质。
3)加酶标抗1体,保温反应。固相***复合物上的抗原与酶标抗1体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗1体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
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