武汉默沙克生物科技(多图)-原装elisa***盒

2).***铵分级分离：在不断搅拌下，每1000mL滤液中慢慢加入226g***铵粉末(相当于0.40饱和度，0℃)，大约在1~2h内加完，置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出，下面混浊液以3 000r/min离心15min，弃沉淀，合并上清液。再按每1000mL上清液加258g***铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌，当***铵全部溶解后，置冷室过夜。次日，虹吸出上清液，沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min，弃去上清液，收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止)，分装于透析袋内，放在流动自来水中进行透析1～2天，直到***铵透析完毕为止(可用5%乙1酸钡溶液或奈氏***进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析，中间更换2~3次，用0.1mol/L硝1酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并，在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min，弃去沉淀，原装elisa***盒，量上清液的体积。

OPD底物显色一般在室外温或37℃反应20-30min后即不再加深，再延长反应时间，可使本底值增1高。OPD底物液受光照会自行变色，显色反应应避光进行，显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD产物用***终止后，显色由橙***转向棕***。

TMB受光照的影响不大，可在室温中置于操作台上，边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性，宜在规定的适当时间阅读结果。TMB经HRP作用后，约40min显色达顶峰，随即逐渐减弱，至2小时后即可完全消退至无色。TMB的终止液有多种，叠氮钠和十二******钠（SDS）等酶***1剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间（12-24小时）不褪，是目视判断的良好终止剂。此外，各类酸性终止液则会使蓝色转变成***，此时可用特定的波长（450nm）测读吸光值。

此IBL***盒能用于小鼠血1清，EDTA血浆，细胞上清中白介素-6的定量检测

　　***盒成分

　　1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG，亲合纯化 96T

　　2 酶标记抗1体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG，亲合纯化 0.4mL x 1

　　3 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2

　　4 E1IA缓冲液: 含1% BSA， 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1

　　5 标记抗1体稀释液: 含1% BSA， 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1

　　6 显色剂: TMB底物液 15mL x 1

　　7 终止液: 1N*** 12mL x 1

　　8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA， 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但***盒没有提供) 酶1标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性***管(用于浓缩酶标记抗1体和显色剂)