过敏原体外检测试剂盒
本试剂盒采用管式酶免（ELISA）分析法，对人血清或血浆
中的过敏原特异性IgE 抗体进行定性/半定量检测。
[概述]
IgE抗体存在于具有过敏体质个体的血清中，这些个体在接触
到特异性过敏原时主要出现速发型过敏反应的症状。对血清中总IgE
抗体水平的检测，可为判定机体对过敏的易感性提供有价值的信息。
而对血清中特异性过敏原检测可对患者进行脱敏治疗提供有力的依
据。皮试是常用的一种简单，低成本的体内过敏原检测方法，但皮
试存在准确性低，结果不易判断以及危险性较大等缺点。体外检测
中的放射过敏吸附试验(RAST)，荧光酶标法(FEIA)和酶标法(ELISA)
已被用于定量检测来源于不同过敏原的IgE抗体。过敏的临床症状主
要包括过敏反应、花粉热、气喘、过敏性湿疹、皮炎、呼吸不畅和
鼻炎。通过检测大部分常见的过敏原或总IgE抗体来诊断过敏反应，
就能更好地预防和治疗。
本试剂盒是一种体外定性/半定量的酶免法，可同时独立地检测
各种常见的过敏反应，并估计人血清或血浆中IgE的总水平。这种独
特的装置由一只反应管组成，反应管中含有一系列塑料段，在这些塑
料段的表面包被有单一过敏原或过敏原混合物或单克隆抗体，这样，
患者血清中的IgE抗体就可以与它们分别反应形成免疫复合物而沉淀
下来。由于过敏原的选择不同，本试剂盒检测的具体内容有多种形式。
每个反应管均带有阳性、阴性对照，有助于结果的分析。
[原理]
当具有过敏抗原固化于表面的载体与病人血清培养在一起后，
血清中特异性IgE（一抗）就会特异地结合到抗原上，此特异结合的
抗体可被酶联的二抗所识别，加入显色剂后，二抗所联的酶使显色剂
由黄色变成紫色。显色的深度与血清中特异性IgE成正比；能半定量
地检测血清中特异性IgE的浓度。
[试剂盒组成]
反应管： 5支
酶联二抗（绿色）：4 毫升 X 1
底物/指示剂:2.5 毫升 X 5
清洗液: 60 毫升 X 1
10 毫升塑料杯 X 5
1 毫升注射器 X 5
需自备的材料: 水槽和自来水,纱布计时器
[贮存] 收到试剂盒后，应将试剂盒贮存在2－6 ℃。
[标本收集] 患者无需特殊的准备，也无需禁食。使用血清或血浆。
标本不需稀释，反应管内吸入标本量约600l。试验前，血清或血浆
应密闭保存在4－8℃中，至多5 天。标本可在-20℃中保存3 个月，
但应避免反复冻融。
[试验操作] 使用前须平衡至25－30 ℃。
1．去掉尾端的封头和顶端的塞子，让反应管内的保存液排出。用纱
布擦试细头。
2．将注射器接在反应管的顶端，将标本由细头抽到注射器接头处，
不要将标本抽入注射器并避免气泡抽入反应管内。将反应管平放，
在室温下(25－30℃)反应2小时。
3．将标本从反应管排出，抽出注射器的推杆，由注射器针筒向反应
管内注入1 毫升清洗液，清洗液让流尽，将注射器的推杆插入并
推到底，用纱布擦试细头。
4．将绿色的酶联二抗由细头抽到注射器的接头处，并避免气泡
抽入反应管内。将反应管平放，在室温下(25－30℃)反应 4
－10 小时。
5．将酶联二抗由反应管排出，抽出注射器的推杆。加五滴清洗
液到注射器针筒中，让它流下。再在注射器针筒内注入1 毫
升清洗液，让它流过反应管。将注射器的推杆插入并推到底，
用纱布擦试细头。
6．在塑料烧杯中注入少量(约2 毫升) 清洗液。通过反应管将
清洗液抽到注射器中。抽出注射器的推杆，让清洗液流出。
7．在注射器针筒内注入1 毫升清洗液，让它自然流下。重复一
次。将注射器的推杆插入并推到底，用纱布擦试细头。
8．将黄色的底物/指示剂通过反应管抽到注射器中。
9．平放反应管，强阳性标本在几分钟内可观察由黄到紫的颜色
变化，弱阳性标本可在90 分钟内观察颜色变化。
注意：为了观察到明显的颜色变化，一旦加入底物/指示剂后，
请勿动反应管，避免晃动管内液体。
[结果解释]
本试剂盒是一种定性/半定量试验，用来检测血清标本中IgE
抗体的水平。对特殊过敏原的强烈过敏反应，会在几分钟内很快
地出现较深的紫色。弱的过敏反应出现颜色变化的时间要长。阴
性结果的颜色与其两边的隔离带的颜色一样。
出结果的最佳时间是在加入底物/指示剂30 分钟时。在这段
时间内，含有来源于(针对)一种或多种过敏原(产生的)IgE 抗体
的血清，无论IgE 抗体水平是正常或已升高，都会在任何相应反
应部分出现特异性的紫色。抗体水平非常低时，可将显色时间适
当延长到90 分钟，也会出现结果，只要特异性的反应颜色能和
反应管中其它部分非特异性的背景区分开即可判断为阳性结果。
本试剂盒中含有多种过敏原，以便尽可能检测出IgE 介导的
过敏反应的患者。反应部分的阳性结果，并不能排除患者对其它
不包含在这试验中的过敏原的敏感性，尤其是树木过敏原的免疫
原性交叉反应是很局限的。同样，阴性的结果并不能说明患者对
其它过敏原不敏感。
[注意事项]
1. 本试剂盒仅供体外检测用. 失效期后的产品请勿使用.
2. 检测板不能重复使用, 也不能供一个以上的样品同时使用. 本试剂盒内各
种试剂不能与其它试剂混用。
4. 操作过程中有可能与病人的血清接触, 建议操作时戴上一次性医用手套.
5. 所有操作均应按照本说明书的步骤进行, 酶联反应中抗原抗体反应是不可
逆的, 要严格注意加样顺序, 不能颠倒.
6. 在检测操作过程有3次加样步骤, 即加标本(血清), 酶结合物, 显色剂. 每
次加样均由与检测板相连的1毫升注射器平稳吸入, 一般加样至注射器接
口, 加入标本或酶结合剂后应仔细检查, 如发现在检测片段表面有气泡,
应将试剂排回试剂瓶后直接重新加样.
7. 实验过程靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物目的. 通过洗涤以清
除残留在检测板中的没能与固相抗原或抗体结合的物质, 以及在反应过程
中吸附于固相载体的干扰物质（蛋白质等), 洗涤是检测操作的关键步骤,
为防止因清洗不彻底导致游离酶残留在管内, 而造成非特异性显色, 操作
者应严格按要求洗涤。