大鼠Elisa***盒简介

    大鼠Elisa***盒的计算：
    以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
    大鼠Elisa***盒标本要求
    1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
    2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3***辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
    操作步骤
    1. 标准品的稀释：本***盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
    480μg/L
    5号标准品
    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
    240μg/L
    4号标准品
    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
    120μg/L
    3号标准品
    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
    60μg/L
    2号标准品
    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
    30μg/L
    1号标准品
    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
    2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标***，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品***终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
    3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
    4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
    5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
    6. 加酶：每孔加入酶标***50μl，空白孔除外。
    7. 温育：操作同3。
    8. 洗涤：操作同5。
    9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂***μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
    10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转***）。
    11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止大鼠脑红蛋白。
来源：大鼠Elisa***盒  http:///yisen001-SonList-775319/
                 http:///st253435/ml